最近收到客戶反饋“正常挑單菌培養(yǎng)的DH5α質(zhì)粒菌提取的質(zhì)粒濃度突然變的好低,是不是試劑盒配方有改動?”。Simgen作為通過ISO質(zhì)量體系認(rèn)證的生產(chǎn)企業(yè),試劑配方若有變動,研發(fā)部、質(zhì)量部、生產(chǎn)部、銷售部都會收到文件通知。既然沒有相關(guān)的文件通知,我們就向客戶索要了培養(yǎng)好的質(zhì)粒菌(K3-1、K3-22)及使用的試劑盒,并使用公司自己培養(yǎng)的質(zhì)粒菌(Simgen-1、Simgen-2)進(jìn)行測試對照。
材料與方法:
Singen實(shí)驗(yàn)室質(zhì)粒菌培養(yǎng)方法:挑取單菌落到10 ml的LB液體(100 μg/ml氨芐濃度)培養(yǎng)基中,37℃、180 rpm過夜培養(yǎng)約16小時。每管收集2 ml菌液。
客戶培養(yǎng)好的質(zhì)粒菌(K3-1、K3-22):每管收集2 ml菌液。
試劑盒:客戶實(shí)驗(yàn)室?guī)Щ氐?/span>Simgen快速質(zhì)粒DNA小量試劑盒,產(chǎn)品批號:20240429
測試方法:按說明書操作步驟提取質(zhì)粒DNA后測質(zhì)粒DNA濃度,并電泳觀察DNA帶型。
測試結(jié)果:
質(zhì)粒提取濃度如下:


1:K3-1;2:K3-22;3:Simgen-1;4:Simgen-2;M:DL2000-G DNA Ladder(Simgen. Cat. No. MD1006-G)。1%瓊脂糖凝膠電泳,120 V 30 min。1和2電泳上樣量均為20 μl,3和4上樣量為1 μl。
討論與分析:
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